Pembukaan acara ditandai dengan beberapa pejabat secara bersamaan membuka tirai yang menutupi gambar bertuliskan tema Biennale Jogja XVI Equator #6 2021, Roots <> Routes.
Acara dilanjutkan dengan melihat karya para seniman di ruang pamer di JNM. Setelahnya, para pengunjung menyaksikan pertunjukan yang diisi oleh Mother Bank Band, Nova Ruth, dan Asep Nanyak.